ساب کلونینگ ژن ngf در وکتورترشحی psectag۲/hygro و بیان آن در سلول های ردۀ pc۱۲

Authors

بهمن جلالی کندری

bahman jalali kondori department of anatomical sciences, school of medicine, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran.گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران. محمد حسین اسدی

mohammad hossein asadi department of anatomical sciences, school of medicine, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran.گروه علوم تشریح، دانشکده پزشکی، دانشگاه علوم پزشکی بقیه الله، تهران، ایران. فاطمه عظمتی

fateme azemati department of biology, school of basic sciences, science and research branch, islamic azad university, tehran, iran.گروه بیولوژی، دانشکده علوم پایه، واحد علوم و تحقیقات، دانشگاه آزاد اسلامی، تهران، ایران.

abstract

مقدمه: ساب کلونینگ ژن های اختصاصی در پلاسمیدها و انتقال آن ها به سلول های هدف به منظور تولید پروتئین های درمانی یا تمایز سلول به عنوان یکی از مؤثرترین روش های درمان برای بیماری های مختلف پیشنهاد می شود. فاکتور رشد عصب (ngf) یکی از اعضای خانواده نوروتروفین ها است. نوروتروفین ها خانواده ای از پروتئین ها هستند که میزان بقاء، تمایز و عملکرد انواع مختلف نورون ها را تنظیم می کنند. مطالعات نشان دادندکه بیان ژن ngf در سلول های بنیادی موجب القای تمایز به سمت سلول های شبه نورون و رشد آکسون و شاخه های آن می گردد. مواد و روش ها: در این تحقیق هضم آنزیمی بر روی یک پلاسمید حامل ژن ngf انجام گردید و این ژن استخراج شد. ژن ngf در پلاسمید ترشحی psectag2 ساب کلون گردید. پلاسمید ساب کلون شده رسوب گیری و تغلیظ گردید. سپس با استفاده از لیپوفکتامین به داخل سلول های ردۀ pc12 ترانسفکت شد. بیان ژن ngf و تولید پروتئین آن با استفاده از روش های rt-pcr و وسترن بلات ارزیابی گردید. یافته ها: تعیین توالی نشان داد که فرایند ساب کلونینگ پلاسمید ترشحی درست بوده است. بیان ژن ngf در سلول های ترانسفکت شده pc12 به وسیلۀ روش rt-pcr نشان داده شد و تولید پروتئین آن در نتایج وسترن بلات اثبات شد. نتیجه گیری: ساب کلونینگ ژن ngf بر روی وکتور ترشحی psectag2 یک روش مناسب جهت انتقال به سلول های یوکاریوتی می باشد.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

ساب کلونینگ ژن NGF در وکتورترشحی pSecTag2/Hygro و بیان آن در سلول‌های ردۀ PC12

مقدمه: ساب کلونینگ ژن‌های اختصاصی در پلاسمیدها و انتقال آن‌ها به سلول‌های هدف به منظور تولید پروتئین‌های درمانی یا تمایز سلول به عنوان یکی از مؤثرترین روش‌های درمان برای بیماری‌های مختلف پیشنهاد می‌شود. فاکتور رشد عصب (NGF) یکی از اعضای خانواده نوروتروفین‌ها است. نوروتروفین‌ها خانواده‌ای از پروتئین‌ها هستند که میزان بقاء، تمایز و عملکرد انواع مختلف نورون‌ها را تنظیم می‌کنند. مطالعات نشان دادندک...

full text

کلونینگ و بیان ژن hly Listeria monocytogenes در Lactococcus lactis

ژن hly یکی از مهم‌ترین عوامل ویرولانس Listeria monocytogenes می‌باشد که پروتئین لیستریولیزین (O (LLO را رمزگذاری می‌کند. LLO یک پروتئین ایمونوژن با قابلیت بالاست، که قادر به برانگیختن ایمنی سلولی و هومورال است و علاوه بر فعالیت همولیتیک، عملکردهای متعدد دیگری نیز دارد. این پروتئین با تخریب فاگولیزوزوم به فرار باکتری از سیتوپلاسم، زنده ماندن و رشد درون سلولیL. monocytogenes کمک می کند.از طرفی La...

full text

کلونینگ و بیان ژن MOMP217 کلامیدیا تراکوماتیس در اشرشیا کولی

Background: Chlamydia trachomatis is a silent, turbulent and unfortunately neglected bacterium which impairs human genital tract function. This Gram-negative obligate intracellular bacterium with unique life cycle and immunopathogenesis result in serious complications, such as Endometritis, pelvic inflammatory disease (PID), infertility, ability to ease HIV transmission and cofactor in human ...

full text

ساب کلونینگ، بیان و تخلیص استرپتوکیناز

استرپتوکیناز (sk) یک داروی ویژه و موثر در درمان ترومبولایتیک سکته های حاد قلبی می باشد. علی رغم وجود محدودیت های قابل توجه، به دلیل قیمت نسبتا پایین استرپتوکیناز، این پروتئین هنوز یک داروی انتخابی به ویژه در کشورهای کم درآمد می باشد. در بررسی حاضر، تولید و تخلیص استرپتوکیناز با استفاده از وکتور بیانی pet21a(+) مورد ارزیابی قرار گرفته است. برای این منظور ابتدا پلاسمید pet21a(+) که حاوی ژن skc (...

15 صفحه اول

Degenerate Four Wave Mixing in Photonic Crystal Fibers

In this study, Four Wave Mixing (FWM) characteristics in photonic crystal fibers are investigated. The effect of channel spacing, phase mismatching, and fiber length on FWM efficiency have been studied. The variation of idler frequency which obtained by this technique with pumping and signal wavelengths has been discussed. The effect of fiber dispersion has been taken into account; we obtain th...

full text

ساب کلونینگ ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز موش سوری در وکتور لنتی ویرال و انتقال آن به رده سلولی HEK

سابقه و هدف: ژن‌درمانی یکی از مهم­ترین شیوه‌های تحقیقات بالینی است که ارایه‌دهنده­ی روش‌های جدیدی برای درمان نقص‌های ژنتیکی می‌باشد. نقص ژنتیکی آنزیم گلوکوسربروزیداز ( Gba ) عامل بیماری گوشه بیش از بقیه‌ی بیماری‌ها در ژن‌درمانی مورد توجه قرار گرفته است. هدف از انجام این پروژه کلونینگ و انتقال ژن آنزیم گلوکوسربروزیداز توسط لنتی ویرال وکتور ارتقایافته به رده‌ی سلول‌های HEK می‌باشد. مواد و روش‌ها:...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
مجله علوم اعصاب شفای خاتم

جلد ۳، شماره ۱، صفحات ۲۱-۲۸

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023